生物實驗報告[經典15篇]

　　我們眼下的社會，報告的使用成為日常生活的常態，報告中提到的所有信息應該是準確無誤的。一聽到寫報告就拖延癥懶癌齊復發？以下是小編精心整理的生物實驗報告，歡迎閱讀與收藏。

生物實驗報告1

　　一、學生基本情況分析：

　　生物學對于七年級學生是新接觸的一門自然科學，多數學生的興趣較濃，學習勁頭較足，涉及到學習方法和學習習慣的逐漸養成，就這次期中考試成績來看，學生基本上考出了自己的真實水平，也有少數學生發揮欠佳。下面就本次期中考試試題作以下分析。

　　二、整體分析：

　　這次期中考試，生物試卷共30分，考試時間18分鐘。試卷由兩大題組成，分選擇題和填空題。突出考察學生基礎知識的掌握情況和實驗的能力。就試卷內容來看，題量比較適宜，難易程度體現了教材的重點、難點，沒有偏題、怪題，覆蓋面比較廣，知識點多且靈活，更能與生活實際中的問題密切結合。對發展學生智力，提高學生能力有所幫助。本次考試平均分為16.8分。

　　三、卷面分析：

　　1.選擇題共10個，共占20分，實得分為12.4分，得分率為62%。錯誤較多的有：2小題、5小題、6小題、8小題、10小題，主要是動植物結構層次部分的內容，理解性較強，學生掌握情況不好。而生物特征本章的內容學生掌握良好，得分率達78%。

　　2．填空題共10分，實得分4.4分，得分率為44%。本大題分為5個小題，主要為實驗探究題，要求學生對實驗的過程，現象要清楚，能根據實驗現象得出結論。學生失分較多，主要是學生對實驗題還有一定的陌生，對實驗步驟上不夠嚴謹，是十分的一個主要原因。

　　四、總述。

　　本次考試認識到了在對七年級的生物教學中存在了一些不足和問題，在以后的輔導中要著重進行基礎知識的復習。所以在下半學期中將采取措施：

　　1、抓基礎，重應用。

　　要重視基礎知識的教學，對重要的生物知識加強理解。對需要識記的'知識，要求學生掌握。加大對學生思維能力的訓練。

　　2、加強知識與實際的聯系與探究。

　　教學中要密切聯系學生的生活，注重培養學生運用知識解決問題的能力。要把知識放到實際問題情境中來學習，讓學生在問題情景中結合自身體驗來思考問題，討論交流，尋求解答途徑。

　　3、重視實驗教學力爭做好每一次演示實驗和分組實驗，引導學生自主探究，提高學生的動手能力和分析，觀察與歸納能力。

　　4、加強專題訓練和針對性訓練。

　　總之，通過這次考試，認真進行總結，反思教學效果。根據學情制定合理的教學計劃，理清工作思路，狠抓課堂教學，注重實效，提高教學質量。

生物實驗報告2

　　一、實驗名稱

　　用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動

　　二、實驗目的

　　1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

　　2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布

　　三、實驗原理

　　高等植物的葉綠體呈橢球狀，在不同的光照條件下，葉綠體可以運動，改變橢球體的方向，這樣既能接受較多的光照，又不至于被強光灼傷。在強光下，葉綠體以其橢球體的'側面朝向光源；在弱光下，葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此，在不同光照條件下采集的葫蘆蘚，其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。

　　四、材料用具

　　蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆

　　五、實驗過程（見書p30）

　　1、制作蘚類葉片的臨時裝片

　　2、用顯微鏡觀察葉綠體

　　3、制作黑藻葉片臨時裝片

　　4、用顯微鏡觀察細胞質流動

　　六、討論

　　1、細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動，為什么？

　　2、葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系？

　　3、植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態，這對于活細胞完成生命活動有什么意義？

　　4、用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。

生物實驗報告3

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞：顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。

　　一、目的：在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片，以供學生操作、觀察，增加了學生動手實驗的時間，使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。

　　二、步驟：

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實驗臺上。

　　2、對光：轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。

　　3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。

　　4、觀察：調節粗準焦螺旋，把所要觀察的.洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。

　　5、左眼向目鏡內看，同時轉動粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。

　　三、注意事項：

　　1、取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。

　　2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。

　　3、切忌一面從目鏡進行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。

　　4、在高倍鏡下調節焦距時，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。

　　5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。

生物實驗報告4

　　一、實驗報告的基本結構

　　1.標題

　　實驗報告的標題應簡明扼要，能夠準確描述實驗的內容。標題通常包括實驗名稱、實驗對象和實驗目的，例如：“觀察豌豆種子的萌發過程”。

　　2.實驗目的

　　實驗目的部分應該清晰明確地表達實驗的研究目標和預期結果。可以從宏觀和微觀兩個方面描述實驗目的，使讀者對實驗有一個全面的了解。

　　3.實驗方法

　　實驗方法部分應詳細描述實驗的操作步驟、使用的儀器和試劑、實驗條件等內容。在描述實驗方法時，要注意使用客觀、準確的語言，避免主觀性和模糊性。

　　4.實驗結果

　　實驗結果部分應該陳述實驗過程中所觀察到的現象和數據，并用表格、圖表等形式呈現數據。記得在說明數據時，要注明測量單位和誤差范圍，以確保數據的可信度。

　　5.結果分析

　　結果分析部分應對實驗結果進行合理的解釋和分析，闡明實驗結果與實驗目的的關聯，并提供相應的數據證據支持。

　　6.結論

　　結論部分是整個實驗報告的總結，應包括對實驗目的`的達成情況、實驗結果的意義和實驗中存在的問題及改進措施等。結論要言簡意賅、明確有力。

　　二、寫作要點

　　1.準確記錄

　　在實驗過程中，要準確記錄實驗操作、觀察結果和數據。只有準確的記錄才能保證實驗報告的真實性和可信度。

　　2.語言規范

　　實驗報告的語言應規范準確，要避免使用口語化和主觀性的用詞，要使用科學術語，確保描述準確、清晰。

　　3.數據處理

　　在實驗結果和數據陳述時，要注意數據的精度和準確度，盡量使用表格、圖表等形式直觀展示數據，便于讀者的理解和比較。

　　4.邏輯嚴謹

　　實驗報告的結構和內容應當嚴謹合理，避免邏輯混亂和內容重復等問題，確保實驗報告的連貫性和完整性。

　　5. 參考文獻

　　在實驗報告中引用相關的參考文獻或資料，以支持實驗的理論基礎和數據解釋，提高實驗報告的可信度和學術性。

　　通過以上介紹，相信大家對于如何撰寫生物實驗報告有了一定的了解。正確撰寫生物實驗報告不僅有利于加深對實驗內容的理解，也是培養學術寫作能力和科研素養的重要手段。希望大家在以后的實驗中能夠嚴格按照實驗報告的要求撰寫報告，提升自身的科研水平。

生物實驗報告5

　　一、實驗目的：

　　1、通過對原核和真核各種形態細胞的光學顯微鏡觀察，了解細胞的形態及其顯微結構；

　　2、學習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀認識。

　　二、實驗材料和儀器：

　　小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；

　　普通光學顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。

　　三、實驗步驟：

　　(一)細胞形態觀察

　　l、動物細胞的觀察

　�。�1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態構造。

　�。�2）雞血細胞涂片的.觀察：觀察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態特點。

　　2、植物細胞的觀察

　　取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。

　　（二）細胞的大小和測量

　　1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。

　　2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

　　3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動目鏡上透鏡進行調焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

　　4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：

　　鏡臺測微尺的格數

　　目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10

　　目鏡測微尺的格數

　　四、實驗結果：

　　1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24

　　2、細胞大小的測量：

　　五、作業與思考：

　　1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。

　　白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。 白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細胞形態見下圖。

　　2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態圖見下。

　　3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更容易測量準確。

生物實驗報告6

　　一觀察洋蔥表皮細胞

　　實驗目的：通過觀察洋蔥表皮細胞，說明植物體是由細胞組成的實驗材料：：顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實驗步驟：

　�。ㄒ�)制做臨時裝片。

　　（1）用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。

　　（2）用液管在載玻片上滴一滴清水。

　　（3）用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。

　�。�4）將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中，用針將其展開。

　�。�5）用鑷子夾住蓋玻片，先將一邊接觸載玻片的水滴邊經再慢慢把蓋玻片放平，制成臨時切片。

　　（4）在蓋玻片的翼側滴加稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引，使染液浸潤標本的全部。

　　（二）安裝臨時裝片：將臨時切片放到顯微鏡上，調整顯微鏡與臨時切片位置，直到可以觀察到清晰的圖像為止實驗圖像：

　　200倍800倍

　　實驗結論：洋蔥表皮是由無數細胞構成的，有明顯的細胞核，細胞壁，細胞質出現。

　　二．觀察人的口腔上皮細胞的實驗教案

　　1、學習要求：

　　1.制作和觀察人的口腔上皮細胞臨時裝片。2.認識人的口腔上皮細胞的基本結構。

　　2、材料用具：

　　生理鹽水，稀碘液，消毒牙簽，滴管，紗布，鑷子，吸水紙，載玻片，蓋玻片，顯微鏡。

　　3、實驗方法和步驟：

　　1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。

　　3.用消毒牙簽在口腔內側壁輕刮幾下放在生理鹽水中。

　　4.用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。

　　5.在蓋玻片的一側滴加幾滴稀碘液，用吸水紙在蓋玻片的另一側吸引，使碘液浸潤標本的全部。

　　總結步驟：

　　擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細胞

　　三．測定某種食物中的能量

　　實驗目標一顆花生種子含有多少能量？

　　實驗器材或藥品 水

　　實驗探究過程 現象

　　分析及結論

　　1、在錐形瓶中裝30ml水

　　實驗前水溫：

　　2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃

　　針上

　　試驗后水溫：

　　3、在酒精燈上點燃花73℃、78℃、68℃

　　4.2J生并盡快把花生放到錐

　　溫差：×51×4.2=6300J

　　形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后，平均值：51.666℃

　　一顆花生種子約含有6300J

　　實驗結的能量論

　　四．探究饅頭在口腔中的變化實驗報告

　　一、問題的提出：取一塊饅頭放到口中咀嚼�？谇恢械酿z頭要經過牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細細品嘗這時的饅頭，你能嘗出一些甜味來。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關呢？如果有關，它們各起什么作用呢？饅頭變甜是否是淀粉發生了變化？

　　二、作出假設饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。饅頭變甜是因為淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成了帶有甜味的麥芽糖。在這個過程中，通過牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎，舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。

　　三、制定計劃（一）實驗原理

　　饅頭變甜應該是成分中糖類發生變化。饅頭的主要成分是淀粉，因此本實驗利用淀粉遇碘變藍的特性，以及口腔中的溫度為37℃的常識。控制變量唾液，以及模擬牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管，兩個對照實驗。一支試管作為實驗組，另兩支試管作為對照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液，滴入碘液后，實驗組的試管內沒有變成藍色，說明饅頭中淀粉的變化與牙齒的'咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。如果變成藍色，則說明淀粉沒有被分解，饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒有關系。（二）實驗變量的控制

　　兩個對照實驗。一個對照實驗的實驗變量是唾液，實驗組內加入唾液2ml，對照組試管加入2ml清水。另一個對照實驗的實驗變量是饅頭塊的狀態：實驗組的饅頭塊用刀切碎，放入試管中并震蕩試管，對照組的饅頭塊不做任何處理，直接整塊放入試管中，并且不震蕩試管。

　　（三）實驗方案實驗材料用具：饅頭塊（三小塊等大）試管（三支）燒杯（三個）盛唾液的小燒杯滴管溫度計石棉網三腳架碘液小刀小木板

　　1.取新鮮的饅頭，切成大小相同的A、B、C三小塊。將A塊和B塊分別用刀細細地切碎，拌勻（模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌），C塊不做任何處理。

　　2.用涼開水將口漱凈，口內含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后，用

　　干凈的鑷子取出棉絮，將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。

　　3.取3支潔凈的試管，分別編上（1）、（2）、（3）號，然后做如下處理：

　　將A饅頭碎屑放入（1）號試管中，注入2ml唾液并震蕩試管；將B饅頭碎屑放入（2）號試管，注入2ml清水并震蕩試管；將C饅頭放入（3）號試管，不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后，取出這三支試管，各滴加2滴碘液，搖勻。然后，觀察并記錄各試管中的顏色變化。四：實施計劃

　　按確定的探究計劃進行實驗，觀察實驗現象�？梢�，（1）號試管中沒有變成藍色；（2）號試管變成藍色；（3）號試管中的饅頭塊部分變成藍色。

　　五、分析實驗結果，得出結論

　　分析實驗現象，（1）號試管中滴入碘液后，沒有變成藍色，說明試管中已經沒有淀粉，淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了，麥芽糖沒有遇碘變藍的特性，所以滴入碘液后不變藍。（2）號試管中加入的是清水和饅頭碎屑，水沒有消化淀粉的作用，因此，滴入碘液后，饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍色。（3）號試管中只有部分變成藍色，說明饅頭與唾液的接觸不充分，只有部分淀粉被分解。由此，得出結論：說明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關系。因為上述活動模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌，（1）號試管中的饅頭接觸到了足量的唾液，并被消化。

生物實驗報告7

　　年級班實驗人：組次：試驗時間：

　　一、探究目的

　　1、通過對螞蟻通訊的探究，加深對動物群體信息交流的理解和認識。

　　2、進一步了解螞蟻的`生活習性。

　　二、探究步驟

　　1、發現并提出問題：______________________________________ 。

　　2、作出假設：___________________________________________________ 。

　　3、制定計劃：

　　4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。

　　5、得出結論：_________________________________________________________ 。

　　6、表達交流。

　　三、討論

　　1、螞蟻的通訊方式是什么/

　　2、何為動物的通訊？

　　3、通訊在社會行為中有什么意義？

生物實驗報告8

　　一、實驗目的

　　初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1、還原糖的鑒定原理

　　生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的'分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。

　　斐林試劑由質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：

　　CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O

　　用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

　　2、蛋白質的鑒定原理

　　鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3、脂肪的鑒定原理

　　脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色

　　三、實驗過程（見書P18）

　　四、實驗用品（見書P18）

　　五、注意

　　1、關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2、斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3、蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B

　　六、討論

　　鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么？

生物實驗報告9

　　一、實驗目的

　　了解高架十字迷宮實驗的原理以及意義，掌握高架十字迷宮實驗的操作方法

　　二、實驗原理

　　高架十字迷宮(High plus maze）是利用動物對新異環境的探究特性和對高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動物的焦慮狀態。高架十字迷宮具有一對開臂和一對閉臂，嚙齒類動物由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動，但出于好奇心和探究性又會在開臂中活動，在面對新奇刺激時，動物同時產生探究的沖動與恐懼，這就造成了探究與回避的沖突行為，從而產生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進入開臂的次數與時間，十字迷宮距離地面較高，相當于人站在峭壁上，使實驗對象產生恐懼和不安心理。高架十字迷宮被廣泛應用于新藥開發/篩選/評價、藥理學、毒理學、預防醫學、神經生物學、動物心理學及行為生物學等多個學科的科學-研究和計算機輔助教學等領域，是開展行為學研究尤其是焦慮抑郁研究的經典實驗。

　　三、實驗動物與器材

　　昆明種小鼠（18-22g），高架十字迷宮（廣州飛迪生物科技有限公司），數據線，電源，電腦

　　四、實驗操作

　　1.雙擊左鍵“動物行為學分析系統”

　　2.進入系統之后，點擊“高架十字迷宮實驗視頻分析系統”

　　3.點擊自己的實驗賬號進入系統，在這里選擇root賬號，默認密碼為空

　　4.在左側邊欄右擊“我的實驗”，然后在打開的實驗信息欄中填寫所需信息，例如輸入實驗名稱“高架”

　　5.填寫完畢后，在左側側邊欄單擊“我的實驗”樹狀欄打開剛才建立的實驗名稱“高架”，右擊實驗名稱，單擊“添加動物”，然后填寫動物的相關信息，例如動物名稱“1”，分組為1。

　　6.點擊分組“1”，在菜單欄上選擇最后一個圖標“系統設置”，再點擊“視頻”出現如下顯示框：

　　7.右擊以上實驗框中左邊欄中的“高架”，可以顯示出“添加實驗箱”，輸入實驗箱信息，例如名稱為“1”

　　8.點擊按鈕“設置當前圖像為背景”；

　　9.接著再次點擊“高架”樹樁目錄可以看到開始設置的實驗箱“1”，點擊進入，下層目錄會出現五個分支“開臂1”“開臂2”“閉臂1”“閉臂2”“中央區域”

　　10.選定“活動區”，就可以選定菜單欄上面各種工具劃定活動區區域大小，如下圖所示：

　　11.選擇合適的識別算法和動物顏色，根據動物在畫面中的`大小調節動物大小，以及根據識別情況調節靈敏度，根據實際測量設置活動箱的高度和寬度，如下圖所示：

　　12.然后就可以點擊“保存”按鈕保存設置，開始實驗錄像的錄制

　　13.點擊主菜單欄第一個按鈕開始錄制，出現如下顯示框：

　　在顯示框中選定待錄像動物和錄像時間等信息，然后點擊“開始錄像”，記錄5分鐘內的活動情況，錄制完成后點擊“退出”后直接退出。

　　14.點擊主菜單欄第三個按鈕“分析數據”分析剛才錄制的錄像，出現如下顯示框：

　　15.設置開始和結束時間的區間范圍可以得出不同時間段的實驗結果，如果想導出excel的結果表單，可以點擊上方“導出結果”導出數據文件，錄像文件默認存儲在程序文件夾里的“Record”文件夾里

　　16.也可以在右側動物欄中最左側右擊，選擇錄像分析，查看軌跡等功能，對數據進行進一步分析。

　　五、實驗結果及討論

　　將測試小鼠編號為M1~M6，分別對其進行測試得到實驗結果如下表1.

　　表1高架十字迷宮結果記錄表

　　小鼠編號M1 M2 M3 M4 M5 M6

　　總時間(s) 220 220 220 220 220 300

　　進臂總次數8 10 10 9 9 10

　　中央進入次數7 10 11 9 9 11

　　進臂總時間(s) 181.27 151.93 98.67 77.73 154.27 129.55

　　中央滯留時間(s) 38.73 68.07 121.33 142.27 65.73 170.45

　　開臂滯留時間(s) 0 0 0 44 0.2 55

　　閉臂滯留時間(s) 181.27 151.93 98.67 33.73 154.07 74.55

　　開臂進入次數0 0 0 5 1 3

　　閉臂進入次數

　　8 10 10 4 8 7

　　開臂滯留時間百分比(%) 0 0 0 20 0.09 18.33

　　閉臂滯留時間百分比(%) 82.39 69.06 44.85 15.33 70.03 24.85

　　開臂進入次數百分比(%) 0 0 0 27.78 5.56 14.29

　　閉臂進入次數百分比(%) 53.33 50 47.62 22.22 44.44 33.33

　　M1~M3小鼠首先經過跳臺實驗才進行高架十字迷宮，而M4~M6首先進行了高架十字迷宮，而且，M4、M5在進行實驗前受到了強烈的電刺激，M6未受到任何刺激即進行高架十字迷宮實驗。

　　由表1可知，M1~M3在經過跳臺實驗的5min訓練與5min記憶測試后，進行高架十字迷宮結果顯示3只小鼠均未曾進入開臂區域，開臂進入次數百分比與開臂滯留時間百分比均為0，表現出極高的焦慮狀態(宗紹波等20xx)。而M4、M5在受到強烈電刺激后，開臂進入次數百分比（%）M4（27.78）大于M6（14.29），而M5（5.56）小于M6（14.29）；開臂滯留時間百分比（%）M4（20）大于M6（18.33），而M5（0.09）小于M6（18.33）。M4與M5在面對強烈電擊刺激后，表現出不同的結果，M4相對M6緩解了焦慮情緒，而M5相對M6焦慮狀態加深，但是依舊比M1~M3更不焦慮。

　　故認為，強烈的電刺激對小鼠的焦慮狀態的影響有個體差異，有的小鼠會因此而焦慮，有的小鼠則感到放松，而M1~M3在跳臺實驗中長時間受到輕微電刺激，焦慮狀態嚴重，小鼠的恐懼顯著強于探索的沖動。但是M4與M6的測試結果雖然顯示M4沒有M6焦慮，數據卻并不具有顯著的差異，故可能是個體差異，需要進行多次重復實驗才能確定強烈電刺激對緩解焦慮是否有效，可能進行多次重復實驗后可以發現，M6焦慮程度屬于個體因素，強烈電刺激會讓小鼠產生焦慮，只是焦慮的強度有所浮動。

　　M1~M6的實驗過程均設定為300s，但是最終導出數據顯示M1~M5測試時長均為220s，僅M6測試時間符合設定為300s.但是M1~M6測試錄像導出后均為300s時長，因此可能是軟件分析功能出現了一些問題。

　　高架十字迷宮實驗在進行中還要注意一些步驟，比如，實驗開始時，實驗者需手持小鼠使其背對實驗者放置在開臂和閉臂的結合處，使小鼠從中央格面面向閉合臂，且實驗中所有小鼠均需面對同一開臂，否則可能會產生數據偏差(王維剛等20xx)。如果在實驗中小鼠從高架十字迷宮上掉落，需要立即從地上抓起放回迷宮并記錄該意外事件，在數據處理時分析影響。

　　六、參考文獻

　　王維剛,吳文婷,周嘉斌,嚴惠敏(20xx).小鼠動物實驗方法系列專題(五) 應用高架十字迷宮

　　分析小鼠焦慮行為. 中國細胞生物學學報, (05): 466-472

　　宗紹波,魏盛,蘇云祥,張惠云,喬明琦(20xx).焦慮大鼠模型高架十字迷宮實驗的復測信度檢

　　驗及參數相關性分析. 中國醫藥導報, (30): 5-7

生物實驗報告10

　　一、實驗目的

　　（一）掌握一般培養基的制備原理及要求，掌握培養基酸堿度的測定，熟悉一

　　般培養基的制備過程和各種器皿滅菌方法。

　　（二）掌握細菌分離培養的基本要領和方法，掌握細菌抹片的制備方法和革蘭

　　氏染色法及油鏡的使用方法，并認識革蘭氏染色的反應特性。

　�。ㄈ�）掌握學習用微生物學原理診斷疾病的一般方法及步驟。

　　二、實驗用品

　�。ㄒ唬┢鞑�

　　量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養箱、水浴培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡

　　（二）試劑及材料

　　肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟

　　三、實驗步驟

　�。ㄒ唬┡囵B基的制備

　�。ㄋ�有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺內完成，并放在無菌操作臺內）

　　1、麥康凱培養基

　　（1）組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖

　　10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml

　�。�2）方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調節

　　ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩

　　液混合，分裝于燒瓶內，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌

　　15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，加入結晶紫和中性紅水溶液，搖勻后

　　傾注平板。

　　注：結晶紫和中性紅水溶液配好后需經高壓滅菌。

　　2、血清平板

　�。�1）組成：營養瓊脂、牛血清

　�。�2）方法：將滅菌的營養瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時，加入牛血清，并

　　混勻，傾注平板。

　　注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。

　　3、lb培養基

　�。�1）組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g

　�。�2）方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，調節ph至7.4，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，傾注平板。

　　4、液體培養基（在lb培養基的基礎上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）

　�。ǘ�）病料取材

　　在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發現，則立即用消毒的器械對其進行生理解剖，觀察其病理特征現象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的`組織物，并注意組織的完整性，用儲物袋密封保存。

　�。ㄈ�）細菌粗培養

　　1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　　2、接種

　　（1）在無菌操作臺酒精燈旁打開用儲物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右

　　手持剪刀，把病料剪出一個小口。

　�。�2）右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭

　　開約20左右，然后將接種環前端插入小口旋轉一下后，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板上。

　　（3）用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記，并將平板倒放。

　　以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個血清平板。

　　3、培養：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。注：劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落，且劃線時接種環應盡量傾斜，以免劃破培養基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　�。ㄋ模┘毦�純培養

　　1、菌落特征判斷

　　待粗培養的細菌培養24小時后，取出用放大鏡觀察記錄單個小菌落的形態特征并用實驗報告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標記，其形態特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。

　　2、取單個菌落進行革蘭氏染色鏡檢

　�。�1）取干凈的載玻片，用記號筆在其一面做好正反面標記，再在載玻片另一

　　面中央滴上一小滴蒸餾水。

　�。�2）將接種環在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標記的單個小菌落中

　　取少許細菌置于蒸餾水中混勻（同時蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌，待冷卻進行染色。

　　（3）先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液

　　染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進行復染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。

　　（4）將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進行鏡檢，觀察其

　　形態特征，判斷細菌的種屬。

　　3、細菌接種培養

　�。�1）消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對

　　無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　�。�2）接種：右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將

　　平皿揭開約20左右，然后將接種環插入揭開的平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記，將平板倒放。

　　（3）將接種好的平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。

　　注：油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　�。ㄎ澹┚�液的制備

　　1、鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養的細菌。

　　2、分裝液體培養基：先對無菌操作臺及需要使用的器械進行消毒滅菌，然后用鉗子揭開一個空試劑瓶，用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內，并立即蓋上液體培養基大試劑瓶瓶塞。

　　3、接種：右手持接種環，用火焰對其進行滅菌，待冷卻后，取出純培養的平板，在無菌操作臺內酒精燈旁，蘸去少許細菌，左手傾斜液體培養基，將接種環，伸入液體培養基內攪動，然后取出對接種火焰環滅菌，并用滅菌的包裝紙捆綁好后，用記號筆做好相應標記，置于一旁。

　　4、培養搖菌：將接種好的液體培養基置于水浴培養箱中培養24小時。注：分裝一個培養基就接種一個培養基，不得全部分裝完后再一個一個接種。

　�。�六）小鼠致病性實驗

　　1、保定：選擇健康的青壯年小白鼠，先用右手抓住尾巴，旋轉數周讓其眩暈，然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚，并翻轉左手，使其頭部朝下，以達到內臟前移的目的。

　　2、接種：先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒，再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。

　　3、觀察：將接種的小白鼠放在適宜的環境下生活，并在鼠籠處用記號筆標記好接種時間、菌種等。

　　4、再培養鑒定：待小白鼠死亡后，對其進行解剖，觀察其內臟病變情況，并取肝臟直接涂在相應培養基上，在適宜條件下反向培養24小時后，取菌落細菌進行鏡檢觀察判斷。

　　注：在注射小白鼠2小時候需要觀察小白鼠是否因注射時傷害到內臟而死亡。

生物實驗報告11

　　實驗目的

　�、睂W習并掌握動物細胞培養的無菌操作技術。

　�、擦私庠�代細胞培養的基本方法及操作過程。

　�、硨W習細胞計數及營養液的配制。

　　實驗原理

　�、奔毎�原代培養

　　原代細胞培養是指直接從動物體內獲取的細胞、組織和器官，經體外培養后，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經消化，分解成單個游離細胞，在人工培養下，使其不斷的生長及繁殖。

　　細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實驗技術。要使細胞能在體外長期生長，必須滿足兩個基本要求：一是供給細胞存活所必須的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環境酸堿度與滲透壓的調節。二是嚴格控制無菌條件。

　�、布毎�死活鑒定死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理，但無論采用何種辦法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質上的差異。

　　染色法分化學染色法和熒光染色法，根據染色機理的不同，染料或使死細胞著色，或使活細胞著色。

　　死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括：

　　☆死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過；而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。臺盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。植物細胞的質壁分離也可鑒定死活。

　　☆死活細胞在代謝上的差異：是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型，因此美藍染色后活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的無還原能力或還原能力極弱，使美藍處于氧化態，從而被染成藍色或淡藍色。

　　除此之外，還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細胞中，細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用，如甲基藍-中性紅混合染色法。

　　實驗用品

　�、辈牧闲“资�

　�、苍噭�

　　臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液（含生長因子）

　�、称鞑�

　　剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學顯微鏡、倒置光學顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板

　　實驗步驟

　�、比〔�

　　取小鼠一只，采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉入超凈工作臺內的`解剖盤中，無菌操作打開腹腔，取出其脾臟，除去其周圍的脂肪組織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉入無菌培養皿中待用。

　�、卜蛛x脾細胞

　　用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。

　　吸取上述分離的單個脾細胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。⒊培養脾細胞

　　取塑料培養皿一套，用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中，并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍（200ul）吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細胞，吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培養箱中培養。

　　⒋配制染液

　　用生理鹽水配成5%臺盼藍染液，備用。⒌染色

　　取0.5mL細胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液。混合。2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀察死活情況，注意不要有

　　氣泡產生，放大倍數為10x10。染色后活細胞不著色，死細胞顯示藍色。注意染色時間不能超過15min，否則染液將細胞毒殺。

　�、队嫈�

　　在10x10倍的顯微鏡下觀察，計算血細胞計數板的4個4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線者計上不計下，計左不計右。

　�、酚嬎慵毎�活力

　　根據公式：細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%

　　實驗結果

　　臺盼藍染色后的細胞（10x10）伊紅染色后的細胞（10x10）

　　總細胞數和活細胞數統計表（10×10）

　　項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個/ml活細胞數個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論

　�、苯Y果分析

　　本次實驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%，并不算高，分析得應有以下原因可能影響實驗結果（包括誤差）：

　　⑴若在無菌操作的過程中操作不規范，導致染菌，會極大的影響觀察，導致實驗失敗。

　�、迫粼陔x心分離呈單細胞的過程中離心機轉速過快或時間過長很可能會導致細胞破裂，導致小鼠脾細胞大量死亡。

　�、侨旧珪r間過長，或觀察時間過長都會導致染色試劑將細胞殺死，使細胞活力驟降，這是導致細胞活力比較低的重要原因。

　　⑷實驗中的一些操作不正確或不規范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導致實驗誤差。

　　⒉注意事項

　　⑴嚴格進行動物消毒，需用75%酒精消毒。

　�、茋栏襁M行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學物質污染。

　�、俏�取液體前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液體時，避免碰撞。

　�、入x心管入臺前，管口、管壁應消毒。

　�、蓪嶒炚唠x開超凈臺時，要隨時用肘部關閉工作窗。

　　⑹器材使用時既要注意用火焰消毒，又要防止燙傷、燙死細胞。

生物實驗報告12

　　霉菌的培養與形態學觀察：實驗一真菌培養基的配制與滅菌

　　實驗目的：

　　（1）了解培養基的配置原理和方法，掌握分離培養微生物的有關準備工作。

　�。�2）掌握高壓滅菌方法及原理

　　實驗原理：

　　（1）培養基的制備原理：

　　培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。

　　從營養角度分析：

　　營養：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機鹽等；?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。

　　瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復融化，其凝固性降低。

　　（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

　　在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫

　　度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。

　　實驗材料與方法

　　配制培養基所需器材

　　實驗設備：高壓蒸汽滅菌器。

　　實驗器材：500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養基、天平、砝碼、

　　稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。

　　培養基等集中放講臺前高壓桶內，送到洗刷室統一高壓滅菌條件及注意事項

　　高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養基113℃，15min。

　　倒平板電爐加熱滅菌好的培養基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項：空氣環境無菌（應在酒精燈火焰周圍無菌區）。

　　a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。

　　b.瓶口要過火焰。

　　c.左手掀開平皿小口。

　　d.傾注滿皿底再多一點，約10ml（7cm直徑平皿）。

　　e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養過程中污染雜菌。

　　f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內，4℃備用。

　　分析與討論

　　（1）如何證明培養基滅菌是否徹底?

　　把滅菌后的培養基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取數管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養一周左右進行檢查。如果培養基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

　　經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

　　（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學和臨床醫學必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達到預防疾病的目的。實際上，除了在臨床醫療實踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學實驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產等過程中都需要避免微生物的污染。

　　實驗二霉菌的接種與培養

　　實驗目的與要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。

　　實驗原理：

　　接種是微生物實驗及科學研究中一項基本操作技術。根據實驗目的和要求，

　　選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關鍵是無菌操作。

　　無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進行，所有器皿均須嚴格消毒，培養基應事先做無菌試驗，

　　接種工具使用前后須經火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養四大類微生物時應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業用菌種，以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）條件下生長良好。多數放線菌為好氧菌，少數為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數適宜在偏堿性環境中生長（PH7.5～8.5）。

　　實驗材料與方法

　�。�1）實驗材料：實驗設備：溫箱。

　　實驗器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。

　　（2）實驗方法：平板接種：毛霉→PDA平板（點植法）

　　啤酒酵母→PDA平板（五區分離劃線法）青霉、曲霉→PDA平板（連續劃線法）

　　小室載玻片培養法：

　　1、取滅菌后小室平皿。

　　2、取無菌PDA瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。

　　3、用接種環取少量霉菌的孢子接種于培養基四周，用無菌鑷子

　　將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標記，置28～30℃培養3～5d

　　糧食產品的平板接種：

　　1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，

　　反復10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內，每皿可接種5-10粒。

　　放線菌的接種：取細黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無

　　菌操作斜插入蓋玻片數張。

　　注意事項：

　　1.空氣環境無菌（應在酒精燈火焰周圍無菌區）

　　2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。

　　3.接種環使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環和金屬絲燒紅即可。

　　4.接種環使用后，先在火焰周圍把環上標本烤干，再燒灼滅菌，以免標本汽化，爆烈四濺，污染環境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物

　　分析與討論

　　1、糧食中產毒真菌的種類及產生毒素？

　　青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素

　　2、常用霉菌培養基有哪些？

　　馬鈴薯蔗糖培養基

　　豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養基察氏培養基

　　3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？

　�。�1）連續劃線法（青霉、曲霉）

　　青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應采用連續劃線接種法接種。（2）點植法（根霉、毛霉）

　　根霉與毛霉生長區域比較大，應采用點植法。（3）小室載玻片培養法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）

　　實驗三霉菌的制片與形態觀察

　　實驗目的：學習并掌握觀察霉菌形態的基本方法；

　　了解四類常見霉菌的基本形態特征。了解放線菌的基本形態特征。

　　實驗原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多（約為3-10μm）,常是細

　　菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液，用此染液做霉菌制片的'特點是細胞不變形，具有殺菌、防腐作用，不易干燥，能保持較長時間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍色能增大反差。

　　實驗材料：

　�。ㄒ唬┚�種：在馬鈴薯瓊脂平板上培養3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；

　�。ǘ�）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。

　　實驗方法：

　�。ㄒ唬┲苯又破�觀察

　　于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻

　　片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡（二）小室培養觀察

　　將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。

　　觀察原則：

　　毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形

　　狀、大小。

　　根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。

　　曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認分生孢

　　子梗、頂囊、小梗和分生孢子。

　　青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生

　　孢子的形狀等。實驗結果：

　　分析與討論：

　　青霉和曲霉的形態有哪些異同？

　　青霉常分布在霉腐變質的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結構，結構的每一個分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進行孢子生殖。

　　曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結構的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。

　　從皮膚取材查真菌如何檢查？

生物實驗報告13

　　實驗日期： 年月 日

　　組長： 組員：

　　一、實驗要求

　　1、練習使用顯微鏡，學習規范的操作方法。

　　2、能夠獨立操作顯微鏡。

　　3、能夠將玻片標本移動到視野中央，并看到清晰的圖像。

　　二、實驗原理

　　三、材料用具

　　顯微鏡，寫有“上”字的玻片，動物、植物玻片標本，擦鏡紙，紗布。

　　四、方法與步驟

　�。ㄒ唬┤＄R和安放

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座

　　2、把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。

　�。ǘ�）對光

　　3、轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔（物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離）。

　　4、把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內（右眼睜開，便于以后同時畫圖）。轉動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡，以看到白亮的視野。

　　（三）觀察

　　5、把所要觀察的'玻片標本（也可以用印有“e”字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。

　　6、轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。

　　7、左眼向目鏡內看，同時反方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

　　注意事項：

　　1、實驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器，把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進鏡箱里，

生物實驗報告14

　　甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表達

　　學生： 學號：

　　同實驗者：

　　<研究背景>

　　谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多種重要生理功能, 抗自由基和抗氧化應激作用, 保護細胞膜的完整性等。γ-GCS是植物細胞中GSH生物合成的限速酶, 可以調控GSH的生物合成量。GSH在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用, 說明γ-GCS也與植物抗逆過程密切相關。

　　實驗一 甘薯葉片RNA提取

　　一、實驗目的

　　1. 了解真核生物RNA提取的原理；

　　2. 掌握Trizol提取的方法和步驟。

　　二、實驗原理

　　Trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總RNA的試劑，在勻漿和裂解過程中，能在破碎細胞、降解細胞其它成分的同時保持RNA的完整性。TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（RNA酶）。0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與氯仿聯合使用可增強抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失，導致細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的.二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后，RNA處于水相中，將水相轉管后用異丙醇沉淀RNA。用這種方法得到的總 RNA中蛋白質和DNA污染很少。

　　三、實驗材料

　　1. 材料

　　甘薯（Ipomoea batatas Lam）葉片，品種為徐薯18

　　2. 試劑

　　① 無RNA酶滅菌水：加入0.01%的DEPC，處理過夜后高壓滅菌；

　�、� Trizol試劑；

　　③ 氯仿；

　　④ 異丙醇、75％乙醇；

　　⑤ TBE緩沖液；

　�、� 上樣緩沖液（6×）

　　3. 儀器

　　高壓滅菌鍋、微量移液器、臺式離心機、超凈工作臺、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統、1.5mL塑料離心管、槍頭和EP管架

　　四、實驗方法

　　1. 將葉片取出放入研缽中，加入適量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物葉片加入1 mL Trizol試劑，室溫放置5 min，使樣品充分裂解；

　　2. 每1 mL Trizol試劑加入200 μL氯仿，用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相；

　　3. 4℃ 12,000 rpm 離心15 min，吸取上層水相轉移到新管中；在上清中加入等體積冰冷的異丙醇，室溫放置15 min；

　　4. 4℃ 12,000 rpm 離心10 min，棄上清，RNA沉淀于管底；

　　5. RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇（用RNase-free水配制），溫和震蕩離心管，懸浮沉淀； 4℃ 8,000 rpm離心2 min，棄上清；

　　6. 室溫放置10 min晾干沉淀；

　　7. 沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O，輕彈管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存；

　　8. 用1%的瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，用EB染色并照相。

　　五、實驗結果

　　1. RNA提取結果

　　依照Trizol 試劑盒方法，提出的RNA較少，此部分未以圖或數據顯示。

　　2. RNA后電泳結果

　　如圖1. 其中9a為本組實驗結果。由圖可知RNA條帶非常模糊，拖尾現象嚴重，幾乎無法分清具體條帶，亮度較大。點樣孔附近的紅色部分為雜質，在提取過程中并未很好除去。

　　圖1. RNA提取跑膠結果。其中1泳道為樣品Marker，9a泳道為本小組RNA樣品。與標準對照可見條帶模糊，拖尾現象嚴重。

　　六、分析與討論

　　1. RNA的提取

　　產量并不多，可能是因裂解樣品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。在實驗過程中，由于對操作時間的掌握不熟練、操作技巧不完善，留上清與棄上清時令RNA損失了部分，使最終RNA產量不理想。

　　2. RNA電泳結果

　　有EB存在時，電泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外燈下應看得很清楚，另出現條由tRNA，5.8S rRNA和5S rRNA組成的較模糊、遷移較快的帶。如果

　　RNA沒有降解，則28S rRNA的亮度應為18S rRNA的2倍，且這兩條帶都無彌散現象發生。由圖1. 9a可知，RNA拖尾現象嚴重，說明RNA已大部分被降解；此外點樣孔附近出現紅色部分雜質，分析可能有并未除盡的蛋白質，同樣影響RNA電泳結果。

　　在進行實驗時，本小組成員未嚴格戴上口罩并勤換手套，這可能使外源

　　RNAase進入樣品，導致其降解嚴重。另外，提取出RNA后本小組未立即將樣品放入-70℃保存，也為導致結果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中，由于水相吸取過多，摻雜入部分蛋白質雜質而未于后續純化步驟除盡，RNA條帶拖尾嚴重可能還受該蛋白質影響。

　　七、總結：

　　本次試驗RNA提取非常失敗，從跑膠結果可見其降解嚴重。雖然大實驗無法避免試劑交叉污染的可能性，且電泳用膠的質量也會影響實驗結果，但從圖

　　1. 2a，3a，2b等條帶較為清晰的小組實驗結果可知，瓊脂糖凝膠質量以及試劑對結果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現了很大失誤。首先口罩、手套應該嚴格按規定佩戴，提取過程對移液槍等儀器使用需謹慎仔細，盡量避免混入雜質。其次為排除部分雜質影響可對RNA樣品用紫外線分光光度計測定吸光值檢驗，將有助于結果分析。最后，細節決定成敗，我們應汲取教訓避免接下來的實驗出現類似問題。

　　實驗二 第1鏈cDNA的合成和模板的驗證

　　一、實驗目的

　　1. 掌握第1鏈cDNA的合成方法和步驟

　　二、實驗原理

　　真核生物基因多為斷裂基因，編碼區不連續，需經轉錄后加工才能成為成熟mRNA。以真核成熟mRNA為模板合成cDNA，進而獲得有連續氨基酸編碼的DNA序列，無需轉錄后加工，即可在原核細胞中表達。

　　真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。引物：Oligo dT（12-18個T）。莫洛尼

　　氏鼠白血病毒逆轉錄酶（M-MLV ）以單鏈RNA為模板，在引物的引發下合成與模板互補的DNA鏈（cDNA）。

　　mRNA 反轉錄生成的cDNA可作為PCR的模板進行擴增稱為RT-PCR，RT-PCR比Northern雜交更靈敏，對RNA的質量要求較低，操作簡便，它是在轉錄水平上檢測基因時空表達的常用方法。

　　三、實驗材料

　　1. 材料

　　徐薯18葉片RNA樣品

　　2. 試劑

　　① dNTP mixture（10 mM each）；

　�、� Oligo (dT) Primer (10 μM)；

　　③ Total RNA；

　　④ RNase free ddH2O；

　　⑤ M-MLV 反轉錄酶；

　�、� 5×First-strand Buffer；

　�、� 0.1 M DTT；

　　⑧ Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)

　　3. 儀器

　　10μL 和100μL 的移液槍、0.5mL的EP管、PCR儀等

　　四、實驗方法

　　1. 在RNase free Microtube 管中配制下列混合液：

　　dNTP mixture（10 mM each）1 μL

　　*Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μL

　　Total RNA2 μL

生物實驗報告15

　　“生命科學是本世紀發展最快的學科之一，作為生命科學的基礎學科和前沿學科，《細胞生物學》是教育中重要的基礎課程，與醫學生后續課程的學習有密切聯系，在學生的知識結構體系中占有重要的地位”[1]。“實驗課是《》教學的重要組成部分，不僅有助于學生理解細胞生物學理論知識，讓學生掌握細胞生物學基本研究技能，而且能啟迪學生的科學思維，培養學生的創新意識和創新能力，對學生綜合素質的發展具有直接而長遠的影響”[2]。近年來，細胞生物學新理念和新技術層出不窮，涌現出了一系列具有先進性和實用性的新內容�！叭欢�，由于《細胞生物學》不是臨床技能考試的科目，因此其理論和實驗的教學方法和手段長期落后于其他基礎醫學課程”[3]，“實驗課的教學從內容上和教學模式上大大滯后于理論課教學”[4]。在我校，細胞生物學是臨床醫學、口腔醫學、預防醫學、醫學檢驗等專業的基礎課。作為西部院校，由于教育經費不足，實驗教學中存在諸多不適應時展的問題，如果不加以及時解決，將難以培養適應時展的高素質創新人才。為此，本文結合我校目前《細胞生物學》實驗教學的實際情況，對存在的問題進行剖析，探討實驗教學改革的措施和方法。

　　1.《細胞生物學》實驗教學存在的問題

　　1.1實驗內容陳舊，教學模式單一

　　目前，我校《細胞生物學》實驗課僅有12學時，由于學時少，僅開設了普通光學顯微鏡使用、顯微測量法、生物作圖基礎、細胞形態結構的觀察、細胞化學成分的顯示和細胞有絲分裂標本的制備與觀察。所開設的實驗均為驗證性實驗，不僅內容陳舊，而且各個實驗之間缺乏相互聯系，造成實驗教學與理論教學嚴重脫節，不利于學生創新精神的培養。原有的實驗教學模式，還是“以教師為主體”進行填鴨式的教學。實驗準備教師課前準備好實驗儀器和相關試劑，上課時由主講教師詳細講解實驗原理和演示操作步驟，學生依照實驗指導書的步驟完成規定的實驗內容，按照教師給定的格式完成。整個過程中，學生只是被動地接受和效仿，不僅不利于對學生思維創新和能力的培養，而且也起不到應用實驗教學培養學生綜合素質能力的作用。

　　1.2教學實驗設備落后

　　細胞生物學是一門發展非常迅速的.學科，各種新技術、新方法和新儀器層出不窮。但我校目前卻面臨著實驗設備數量嚴重不足的窘境，一些實驗操作常常無法細化到每一位學生。另外，由于經費的原因，導致一些性能落后和老化的設備沒能得到及時更新，無法開設涉及新技術和新方法的實驗，嚴重挫傷了學生學習的積極性。

　　1.3考核評價體系不夠科學

　　實驗考核成績以教師評價打分為主，以實驗報告的成績來評定，而對學生實驗過程中的實驗設計、實驗方法和操作技能幾乎不涉及，這種單一的評價方式無法避免教師單邊傾向，忽略了實驗過程中形成性評價，難以客觀公正地評價學生的學習效果和學習主動性，不利于學生實驗操作能力和科研創新能力的培養。

　　2.細胞生物學實驗教學改革思路

　　2.1精選實驗內容，改變單一教學模式

　　對原有實驗教學內容進行認真篩選，剔除重復和過時的實驗項目，補充反映學科發展前沿的新實驗，增加實用性、設計實驗比重，內容不斷補充完善。把與《細胞工程》實驗重復的“細胞的原代培養”和“培養細胞的觀察、記數及活力測定”刪除，結合學科發展，增設設計性實驗“應用細胞融合技術制備染色體提前凝集標本”及“細胞凋亡的誘導與形態學檢測”，鼓勵學生在設計性實驗項目下進行大膽創新，開拓新的實驗項目或課題。實驗課采用多種教學方法調動學生主觀能動性，如：設計性實驗前安排學生自己配試劑，授課過程中綜合運用多種教學方法，如：啟發式、PBL模式、互動式展開教學，引導學生對實驗進行分析，甚至改進實驗方法和實驗步驟；啟發學生尋找問題、分析問題和解決問題，激發學生自主學習和探究學習的積極性。

　　2.2建立實驗網絡教學輔助平臺

　　多媒體具有形象、逼真和直觀等優點，一些難以觀察清楚的現象、難度較大、不易開展的先進性實驗，借助多媒體可以使其生動活潑、形象和直觀地表現出來。細胞生物學發展的日新月異，讓反映細胞生物學現展水平的實驗，通過多媒體技術，將實驗操作過程拍攝成錄像，將實驗結果拍攝成彩色顯微圖片介紹給學生。此外，通過網絡收集或購買光盤資料，能獲取一些具有代表性的高、精、尖實驗技術的資料，用于構建實驗網絡教學輔助平臺，開辟一個資源豐富的開放式網絡教學平臺，拓寬教學的時間和空間。網站內容包括實驗大綱、實驗內容、實驗教案、多媒體課件、實驗視頻、練習自測實驗動畫、實驗圖片和虛擬實驗等，擴大了實驗教學的信息量和覆蓋面，為學生提升實驗技能和從事科學研究打下良好基礎。

　　2.3完善考評體系，全面提高教學質量

　　作為實驗教學過程的重要組成部分，科學地進行考核是提高學生學習積極性和保證教學質量的重要手段�？荚u體系應全面反映學生的實驗態度、操作技能、實驗過程中解決問題和分析問題的能力。為此，將實驗考核細化為平時成績（包括出勤率、實驗態度和課堂表現等）、實驗報告、設計性實驗的實施和實驗綜合技能考試三大塊，比例分別為20%，15%，25%，40%，實驗考核成績占總成績的40%。這樣，不僅可以加強學生對實驗的重視程度，而且可以促進學生動手能力和創新能力的培養。教師在第一次開課時就將實驗考核方案告知學生，使學生明確考核的評分標準和課程的最終評價體系。在教學過程中，任課教師還根據不同階段的教學要求，靈活運用課堂討論、實驗報告、設計性實驗等多種方式，了解學生的學習情況及存在問題，讓考核貫穿全程，從而使實驗課程考核向注重能力考核轉變，使學生更加注重平時的自主學習。

　　總之，實驗教學是《細胞生物學》課程不可缺少的重要組成部分，要構建適應時展的西部醫學院�！都毎�生物學》實驗教學體系，就必須充分調動學生學習的主動性和積極性，充分發揮實驗課教學的優勢與特點，為培養適應時展的高素質醫學人才創造條件。

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